тРНК синтезуються звичайною РНК-полімеразою у разі прокаріотів та РНК-полімеразою III у разі еукаріотів. Транскрипти генів тРНК піддаються багатостадійному процесингу, що зрештою призводить до формування типової для тРНК просторової структури.

Транспортні РНК (ТРНК) теж збираються в ядрі, а потім переміщуються до цитоплазми. Вони утворені невеликою кількістю нуклеотидів (\(70\)-\(90\)). У клітині тРНК міститься приблизно (10) %. тРНК транспортують амінокислоти до місця синтезу білка на рибосомі.

Відомо, що всі види РНК синтезуються на ДНК-матриці. Фрагмент молекули ДНК, на якій синтезується ділянка центральної петлі тРНКмає наступну послідовність нуклеотидів (верхній ланцюг смисловий, нижня транскрибируемая).

Всі види РНК – інформаційна, транспортна та рибосомальна – синтезуються у ядрі клітини на ДНК.